Bäş güýç:
Nuklein kislotasyny çykarmak we arassalanan ädim bilen düzülen gural
Ultrases ses çykarmak moduly bilen düzülen gural
Fully Doly awtomatiki usulda düzülen gural
Vari Üýtgeýän temperaturany güýçlendirmek bilen düzülen gural
Full Doly ýapyk reagent toplumy bilen düzülen gural
1.Nuklein kislotasyny kesgitleýji reagentleri çykarmalymy we arassalamalymy?
Nuklein kislotasyny kesgitlemegiň ýörelgesi şeýleräk: primeriň täsiri astynda DNK / RNA şablony (NA-nyň ters transkripsiýasyny talap edýän) zynjyr reaksiýasyny güýçlendirmek üçin DNK polimeraza ulanylýar, soň bolsa kesgitlenen floresan signalyň mukdary kesgitlenýär! nusgada ýüze çykaryljak patogeniň nuklein kislotasynyň (DNK / RNA) bardygyny ýa-da ýokdugyny.
1) Çykarylmadyk ýa-da arassalanmadyk nusgalarda ahyrky netijä täsir edýän köp komponent bolup biler: nukleaz (maksatly nuklein kislotasyny eräp we ýalan negatiwlige sebäp bolup biler), proteaz (DNK polimerazyny azaldyp we ýalan negatiw sebäp bolup biler), agyr metal duz (sintazyň hereketsizleşmegine we ýalňyş polo positiveitel sebäp bolmagyna), aşa kislotaly ýa-da aşa aşgar PH (reaksiýanyň şowsuz bolmagyna sebäp bolup biler), Doly däl RNK (ýalan ters ters transkripsiýa sebäp bolýar).
2) Käbir nusgalary gönüden-göni güýçlendirmek kyn: Gram-pozitiw we käbir parazitler, galyň öýjük diwarlary we beýleki gurluşlary sebäpli, nuklein kislotasyny çykarmak we arassalamak prosesi geçmese, çykarylmaz toplum bular üçin şowsuz bolup biler. nusgalary.
Şonuň üçin nuklein kislotasyny çykarmak basgançagy bilen gurlan synag toplumyny ýa-da guralyny saýlamak maslahat berilýär.
2. Himiki çykarmak ýa-da fiziki ultrases böleklerini çykarmak?
Umuman aýdanyňda, himiki gazyp almak deslapky we Puriationyň köpüsine ulanylyp bilner.Şeýle-de bolsa, galyň diwarly Gram-pozitiw bakteriýalarda we käbir parazitlerde himiki çykaryşyň täsirli nuklein kislotasynyň şablonlaryny alyp bilmejekdigi, ýalňyş negatiw ýüze çykarylmagyna sebäp bolýar.Mundan başga-da, himiki gazyp almak köplenç güýçli serişdeleri ulanýar, eger elitasiýa düýpli bolmasa, reaksiýa ulgamyna güýçli aşgarlary girizmek aňsat, netijede nädogry netijeler bolýar.
Ultrasoniki böleklere bölünmek, POCT-iň öňdebaryjy kärhanasy bolan GeneXpert tarapyndan adam üçin üstünlikli ulanylýan we käbir çylşyrymly nusgalaryň (Mikobakteriýa inçekeseli ýaly) nuklein kislotasyny çykarmakda düýpli artykmaçlygy bolan fiziki eziji ulanýar.
Şonuň üçin nuklein kislotasyny çykarmak basgançagy bilen gurlan synag toplumyny ýa-da guralyny saýlamak maslahat berilýär.we ultrases ses çykarmak moduly bar bolsa iň amatlydyr.
3. El bilen, ýarym awtomat we doly awtomatiki?
Bu zähmet bahasy we iş netijeliligi meselesidir.Häzirki wagtda öý haýwanlary hassahanalarynda ýeterlik stawkasyz, nuklein kislotasyny çykarmak we ýüze çykarmak belli bir hünär we tejribe talap edýän iş.Doly awtomatiki nuklein kislotasyny çykarmak we kesgitlemek maşynynyň iň oňat saýlawdygyna şek ýok.
4. Yzygiderli temperaturanyň güýçlendirilmegi ýa-da üýtgeýän temperaturanyň güýçlendirilmegi?
Amplýasiýa reaksiýasy nuklein kislotasyny kesgitlemek baglanyşygydyr we bu baglanyşyk bilen baglanyşykly hünär tehnologiýasy çylşyrymly.Takyk aýdanymyzda, nuklein kislotasyny güýçlendirmek üçin fermentler ulanylýar.Amplýasiýa prosesinde ampli fi uoresensiýa signaly ýa-da oturdylan fl uoresensiýa signaly tapylýar.Umuman aýdanyňda, fl uorescence signaly näçe ir peýda bolsa, nusganyň maksatly gen mazmuny şonça-da köp bolýar.
Yzygiderli temperatura ampliasiýasy, ýokary temperaturada nuklein kislotasynyň amplifikasiýasy, üýtgeýän temperatura amplifikasiýasy bolsa denaturasiýa-anneal-uzalma laýyklykda berk sikl amplifikasiýasydyr.Üznüksiz temperaturany güýçlendirmek wagty amala aşyryldy, üýtgeýän temperaturany güýçlendirmek wagty guralyň temperaturasynyň ýokarlanmagy we düşmegi bilen ep-esli derejede täsir edýär (häzirki wagtda köp öndürijiler takmynan 30 minutda 40 aýlaw güýçlendirip bildi).
Laboratoriýa şertleri gowy bolsa we sebitleşdirme berk bolsa, ikisiniň arasyndaky takyklyk tapawudynyň uly bolmajakdygyny aýtmak ýerliklidir.Şeýle-de bolsa, üýtgeýän temperatura ampliasiýasy has gysga wagtda has köp nuklein kislotasynyň önümini sintez eder.Gaty bölünişiksiz we hünär taýýar hünärmenleri bolmadyk laboratoriýalar üçin nuklein kislotasynyň aerozolyň syzmak howpy has uly bolar, ýalan pozitiw syzmak ýüze çykandan soň ýüze çykýar we ýok etmek gaty kyn.
Mundan başga-da, nusga çylşyrymly bolanda yzygiderli temperaturanyň güýçlendirilmegi, aýratyn däl ampliasiýa has ýykgyn edýär (otnositel reaksiýanyň temperaturasy pes we uzaldyş temperaturasy näçe ýokary bolsa, deslapky baglanyşyk şäheri şonça gowy).
Häzirki tehnologiýa barada aýdylanda, üýtgeýän temperaturanyň güýçlendirilmegi has ygtybarlydyr.
5. Nuklein kislotasynyň ampliasiýa önümleriniň syzmak howpundan nädip saklanmaly?
Häzirki wagtda köp öndürijiler, sürtülme bilen möhürlenen nuklein kislotasynyň reaksiýa turbasy hökmünde bezeg görnüşli PCR turbasyny saýlaýarlar we üýtgeýän temperatura PCR ampliasiýasynda üýtgeýän temperatura denaturasiýasynda temperatura denaturasiýasy 90 dereje ýetýär.
Centigrade.Heatylylyk we sowuk bilen gysylmak bilen gaýtalanýan giňeliş prosesi PCR turbasynyň möhürlenmegi üçin uly kynçylykdyr we bez görnüşli PCR turbasynyň syzmagyna sebäp bolmak has aňsat.
Reaksiýa önüminiň syzmazlygy üçin reaksiýany doly möhürlenen toplum / turba bilen kabul etmek has gowudyr.Nuklein kislotasyny çykarmak we ýüze çykarmak üçin doly möhürlenen toplum bar bolsa, gaty gowy bolardy.
Şeýlelik bilen “New Tech” -iň täze doly awtomatiki nuklein kislotasyny çykarmak we kesgitlemek maşynynda ýokardaky iň amatly saýlawlar bar.
Iş wagty: Awgust-09-2023
